基因擴增實驗又稱PCR實驗,其特點是能將微量的DNA大幅增加,PCR是分子生物學(xué)研究和實驗的常規(guī)方法,廣泛應(yīng)用于生物學(xué)各個領(lǐng)域,例如:檢驗艾滋病、乙型肝炎、禽疫病、癌基因的檢測和診斷,DNA指紋、個體識別、親自鑒別及法醫(yī)物證,動、植物檢疫,動物及其衍生產(chǎn)品檢測,動物飼料、化妝品、食品衛(wèi)生檢測,轉(zhuǎn)基因作物與轉(zhuǎn)基因微生物檢測等。
PCR實驗室平面布局
基因擴增實驗室又稱PCR實驗室,實驗室原則上分為4個單獨的工作區(qū)域,前兩區(qū)為擴增前區(qū),后兩區(qū)為擴增后區(qū)。擴增前區(qū)與擴增后區(qū)應(yīng)嚴(yán)格分開。實驗材料、試劑、記錄紙、筆、清潔材料等,只能從擴增前區(qū)流向擴增后區(qū),即從試劑準(zhǔn)備區(qū)→樣品制備區(qū)→擴增區(qū)→擴增產(chǎn)物分析區(qū),不得逆向流動。實驗室的氣流也應(yīng)從擴增前區(qū)流向擴增后區(qū),不得逆向流動。各工作區(qū)域應(yīng)設(shè)置緩沖間,工作間與緩沖間之間宜安裝連鎖裝置。
不同功能的核酸檢驗工作區(qū)應(yīng)使分格獨立的工作室,并有明顯的標(biāo)志,各區(qū)間不能直通。各區(qū)之間如果是緊密相連,需安裝物品傳遞窗。每個工作區(qū)域的頂部應(yīng)安裝紫外燈,紫外燈的波長為254nm,安裝數(shù)量為每20m2安裝一支40W的紫外燈。
實驗室較為理想的布局模式為有一個專用走廊,試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣品制備區(qū)、擴增區(qū)和產(chǎn)物分析區(qū)很規(guī)范地排列在一起,前三個區(qū)各有一個緩沖間,可供換工作服和工作鞋使用,頂上可裝一紫外燈。
內(nèi)實驗區(qū)域設(shè)為正壓或常壓狀態(tài),緩沖間內(nèi)設(shè)為負(fù)壓狀態(tài)(可上設(shè)一抽風(fēng)裝置),使這三個區(qū)的空氣流向為由實驗區(qū)域內(nèi)向外,緩沖間內(nèi)通向?qū)嶒炇液妥呃鹊拈T可安裝一種連鎖裝置,當(dāng)一個門打開時,另一門必須處于關(guān)閉狀態(tài),防止出現(xiàn)兩個門同時打開的情況。
產(chǎn)物分析區(qū)可不設(shè)緩沖間,但應(yīng)設(shè)為負(fù)壓狀態(tài)(裝一個排風(fēng)扇即可),使空氣流向由外向內(nèi),以防止擴增產(chǎn)物的隨空氣流出。每一區(qū)域都必須有明確的標(biāo)記,工作按試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣品制備區(qū)、擴增區(qū)至產(chǎn)物分析區(qū)單一流向進(jìn)行,各區(qū)的儀器設(shè)備包括工作服、鞋、實驗記錄本和筆都必須專用。
如果無法做到以上模式,以下基本要求必須做到:
(1)四個區(qū)域必須是相互獨立的。
(2)各區(qū)的儀器設(shè)備及各種物品必須是專用的。
(3)各區(qū)完全獨立,緩沖間可有可無。如為一個區(qū)套一個區(qū)的模式,取件不能直通,應(yīng)有緩沖間,供換工作服及鞋子用,并保證兩個區(qū)域間始終處于完全的分隔狀態(tài)。
(4)產(chǎn)物分析區(qū)應(yīng)安裝排風(fēng)扇或其他抽風(fēng)裝置,維持負(fù)壓。
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